流式细胞术方案设计解析（上）

石榴花开

      

我们时常会遇到，明明染色Marker都来自一篇文献，但是最后实验结果却变成“买家秀与卖家秀”。

产生这种现象的原因是什么？以及我们为什么要如何优化我们的染色方案呢？我们先看具体的例子。

方案1与方案2，所选择的marker都一致，所选用的荧光素种类一样，但是搭配不一样。那么我们看看同一个样本，最后各个细胞亚群的结果一样吗？

方案1与方案2，CD4+CD25+ 的百分比接近（A与C比较），可是CD8+CD69+的百分比却相差很多（C与D比较）。 造成这种原因其实就是我们平时说到到spreading现象。

Nguyen, Richard, et al. "Quantifying spillover spreading for comparing instrument performance and aiding in multicolor panel design." Cytometry Part A 83.3 (2013): 306-315. 如果要优化流式染色方案中，由spreading现象产生的分辨率降低，我们可以使用SWOFF方法。通过如下流程，就可以很快找出究竟是由于那个通道的配色不合理，导致分辨能力下降。

在不同的检测平台，元件的光电转化效率会直接影响仪器总体分辨率。

不仅如此，科技的进步带来的还有更小的spreading现象，这使得配色也更加的轻松，结果也更加的准确。

你想知道如何检查自己的染色方案么？利用SWOFF的方法，可以帮您发现并且优化，使检测更加准确。点击下方阅读全文，获取SWOFF的详细步骤。