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【植物血球凝集素PHA-P】用途_简介说明_试剂准备_注意事项

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    2024-8-22 09:21
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      【植物血球凝集素PHA-P】详细说明
      【简介说明】
      植物血球凝集素(Phytohaemagglutinin,PHA) 也称植物血凝素,为低聚糖(由D一甘露糖、氨基葡萄糖酸衍生物所构成)与蛋白质的复合物,属于高分子糖蛋白类,存在于一些豆类种子中,对红细胞有一定凝集作用故名。
      【试剂准备】
      1、TE: 10mM Tris-HCl (pH 7.8); 1mM EDTA (pH 8.0)。
      2、TBS: 25mM Tris-HCl (pH 7.4); 200mM NaCl; 5mM KCl。
      3、裂解缓冲液:250mM SDS; 使用前加入蛋白酶K至100mg/ml。
      4、20% SDS
      5、2mg/ml蛋白酶K
      6、Tris饱和酚(pH 8.0)、酚/lv仿(酚∶lv仿=1∶1)、lv仿
      7、无水乙醇、75%乙醇
      【用途】
      PHA是一种促细胞分裂原(mitogen)。在体外能刺激小淋细胞转化成具有免疫活性的淋细胞,并促进其分裂。转化的淋巴细胞能分泌各种淋巴因子。
      1、PHA对外周周血淋巴细胞的转化作用。外周血淋巴细胞与PHA在体外一起培养,可使小淋巴细胞转化为淋巴母细胞。
      2、PHA刺激淋巴细胞有丝分裂。
      3、PHA能增强淋巴细胞玫瑰花环率,可用以判断机体细胞免疫功能。
      4、PHA有促进腹腔巨噬细胞的吞噬作用。
      5、PHA能诱导产生细胞移动抑制因子。
      6、PHA能用于淋巴细胞亚太群研究。
      【注意事项】
      1、所有用品均需要高温高压,以灭活残余的DNA酶。
      2、所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。
      3、用大口滴管或吸头操作,以尽量减少打断DNA的可能性。
      4、用上述方法提取的DNA纯度可以满足一般实验(如Southern 杂交、PCR等)目的。如要求更高,可参考有关资料进行DNA纯化。
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