分光光度计的使用

仪器千里

分光光度计是利用物质对光的吸收特性进行定性和定量分析的仪器，广泛应用于化学、生物、**等领域。其使用步骤如下：
一、前期准备
样品处理
液体样品：确保澄清无杂质(若浑浊需离心或过滤)，根据检测需求稀释至合适浓度(避免吸光度超出仪器线性范围，通常 0.2-0.8 为宜)。
固体样品：需溶解或制成均匀悬液，选择合适溶剂(如蒸馏水、乙醇等)。
仪器检查
确认电源连接正常，开机前检查比色皿是否清洁(避免指纹、划痕，可用擦镜纸擦拭)，配套比色皿需配对使用(减少误差)。
二、操作步骤
开机预热
打开主机电源，选择测量模式(如 “吸光度”“透光率”)，设置所需波长(根据样品最大吸收峰确定，如核酸在 260nm，蛋白质在 280nm)，预热 15-30 分钟(保证光源稳定)。
空白校正
将装有溶剂(如溶解样品的蒸馏水)的比色皿放入样品室，确保光路对准比色皿透光面，盖好盖子。
按 “空白” 或 “调零” 键，使仪器显示吸光度为 0(透光率 100%)，消除溶剂对光的吸收干扰。
样品测量
将待测样品注入比色皿(约 2/3 容积，避免溢出)，擦净外壁后放入样品室，记录吸光度(或透光率)数值。
同一样品建议测量 3 次取平均值，减少偶然误差。
数据记录与计算
若用于定量分析，需先绘制标准曲线(测量一系列已知浓度标准品的吸光度，建立浓度与吸光度的线性关系)，再根据样品吸光度代入曲线计算浓度。
三、注意事项
比色皿使用：避免用手触摸透光面，强酸强碱样品需用石英比色皿(玻璃比色皿不适用于紫外区)。
仪器维护：测量完毕后，及时取出比色皿，倒出样品并清洗(特殊样品需用专用溶剂清洗)，关闭仪器时先关主机再断电源。
误差控制：同一批实验需使用同一台仪器、同一套比色皿，避免波长或温度波动影响结果。
通过以上步骤，可快速实现样品的浓度测定或纯度分析，核心是利用 “朗伯 - 比尔定律”(吸光度与物质浓度成正比)，确保操作规范能显著提高数据准确性。