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动物细胞模型怎么做?

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助理技师

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发表于 昨天 13:50 | 显示全部楼层 |阅读模式
制作动物细胞模型需根据研究目标选择方法,以下是常见流程:
1、原代细胞模型:取动物组织(如小鼠肝脏),剪碎后用胰酶消化分散成单细胞,接种于含血清的培养基,在 37℃、5% CO₂培养箱中培养,待细胞贴壁生长后用于实验,可保留组织特异性,但传代次数有限。

2、永生化细胞模型:对原代细胞通过病毒转化(如 SV40)或基因编辑使其无限增殖,如 HeLa 细胞、RAW264.7 巨噬细胞等,适合长期实验和大规模筛选,但需注意功能差异。

3、基因修饰模型:用 CRISPR/Cas9 敲除或过表达目标基因,或通过 RNAi 沉默特定基因,构建疾病相关细胞模型(如敲除 p53 的癌细胞模型),需通过测序验证基因编辑效果。

4、类器官模型:将干细胞或器官前体细胞在三维培养基中诱导分化,形成模拟器官结构的类器官(如肠道类器官),需调控细胞因子诱导分化,通过免疫荧光验证结构完整性。
制作后需检测细胞活性、形态及目标标志物,确保模型符合实验需求。

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