反式脂肪酸检测方法

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反式脂肪酸的检测方法多样，主要包括气相色谱法、红外光谱法、银离子色谱法、气相色谱质谱法及毛细管电泳法，各方法原理、步骤及特点如下：

• 气相色谱法（GC）：
  • 原理：通过极性毛细管柱将顺、反式脂肪酸分离并测定。GC法是我国国标和AOCS标准中使用较多的方法，具有高灵敏度和高分离度的特点。
  • 步骤：样品经过甲酯化处理后，使用长100m的氰丙基硅氧烷柱（如SP 2560或CP Sil 88）进行分离，反式异构体在顺式异构体前流出。
  • 特点：适用于人工反式脂肪酸的检测，近年来离子液体色谱柱（如SLB-IL111）的引入进一步提高了分离效果。
    
• 红外光谱法（IR）：
  • 原理：利用非共轭反式双键在红外966 cm⁻¹处有最大吸收峰的特性进行测定，峰面积与浓度呈线性关系。
  • 步骤：将油脂中的脂肪酸进行甲酯化处理后，在900-1050 cm⁻¹波数范围内进行红外光谱分析。
  • 特点：快速方便，适用于测定5%以上反式脂肪酸的油样。衰减全反射傅里叶变换红外光谱法（ATR-FTIR）及负二阶导数法能解决共轭双键、游离羧基和甘油羟基的干扰，测到含量<1%的反式脂肪酸。
    
• 银离子色谱法（Ag+-TLC/Ag+-HPLC）：
  • 原理：Ag+对双键的络合强度随双键数而增强，随链长而减弱，据此可分析脂肪酸的顺、反异构体。
  • 步骤：Ag+-TLC将顺、反式脂肪酸分离成不同谱带，用溶剂萃取后再定量；Ag+-HPLC则直接用于顺、反式不饱和脂肪酸的分离。
  • 特点：适用于天然反式脂肪酸的检测，尤其是乳脂中复杂的共轭反式脂肪酸成分。Ag+-HPLC相比Ag+-TLC具有更高的分离度和操作便捷性。
    
• 气相色谱质谱法（GC-MS）：
  • 原理：结合气相色谱的分离能力和质谱的定性能力，对反式脂肪酸进行准确测定。
  • 步骤：样品经过甲酯化处理后，使用气相色谱进行分离，质谱检测器进行定性定量分析。
  • 特点：具有较宽的检测范围和较高的检测水平，且不会降解目标分析物。适用于复杂样品中反式脂肪酸的检测。