脂肪酸的测定方法和原理

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脂肪酸的测定方法主要包括气相色谱法（GC）、气相色谱-质谱联用法（GC-MS）以及滴定法等，其原理基于脂肪酸甲酯化后的分离和检测，以下是具体介绍：

测定方法

• 气相色谱法（GC）
  • 原理：利用试样中各组分在色谱柱中的气相和固定液液相间的分配系数不同，当气化后的试样被载气带入色谱柱中运行时，组分就在其中的两相间进行反复多次的分配（吸附-解吸附或溶解-放出）。由于固定相对各组分的吸附或溶解能力不同，因此各组分在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，试样中被分离的各组分即能达到完全分离。
  • 操作步骤：通常包括脂肪提取、甲酯化、色谱分析等步骤。脂肪提取可采用索氏提取或氯仿-甲醇法等方法；甲酯化过程通常涉及使用如氢氧化钠甲醇溶液、硫酸甲醇溶液等试剂，将脂肪酸酯转化为相应的脂肪酸甲酯；色谱分析则使用气相色谱仪进行。
    
• 气相色谱-质谱联用法（GC-MS）
  • 原理：结合了气相色谱的分离能力和质谱的定性、定量能力。样品经GC分离为单一组分，各组分依次与载气同时流出色谱柱，再经接口进入质谱仪。样品分子在离子源内电离，产生各种各样的离子，这些离子经过质量分析器按其质荷比分离，分离后的离子依次被检测器检测，并形成一个按离子质荷比排列的质谱图。计算机自动检索并迅速识别样品，提供各组分的定性和定量信息。
  • 操作步骤：与气相色谱法类似，但在色谱分析后增加了质谱分析步骤。
    
• 滴定法
  • 原理：使用氢氧化钾-乙醇溶液滴定中和提取液中的游离脂肪酸，以酚酞变色显示终点。该方法简单易行，不需要特殊仪器和试剂。
  • 操作步骤：包括试样处理、测定和空白试验等步骤。试样处理通常是用无水乙醇提取脂肪酸；测定则是用氢氧化钾-乙醇溶液滴定提取液中的游离脂肪酸；空白试验则是用无水乙醇代替试样进行滴定，以消除系统误差。
    
  
  

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