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荧光酶标仪和普通酶标仪在检测原理、检测灵敏度、应用范围和操作特点等方面存在明显区别,具体如下: - 检测原理:
- 普通酶标仪:通过酶催化反应产生的物质对光的吸收、散射等性质进行检测,主要是基于光吸收原理,特定波长的光通过微孔板中的样品后,光能量被吸收,被吸收的光能量与样品浓度呈一定比例关系,从而进行定性和定量检测。
- 荧光酶标仪:基于被检测物质或试剂标记上的荧光分子,通过激光或LED作为光源,激发分子内的电子从基态跃迁到激发态,从而发射出荧光信号,通过光电探测器测量光强度,实现定量分析。
- 检测灵敏度:
- 普通酶标仪:灵敏度相对较低,动态范围窄,特异性不强。
- 荧光酶标仪:检测灵敏度和特异性较高,荧光法通常比比色法高10 - 100倍,适合低浓度样本的检测。
- 应用范围:
- 普通酶标仪:主要用于酶的定量、质量检测和反应过程的监测,在低紫外区的DNA、RNA定量及纯度分析、蛋白定量、酶活、酶动力学检测、酶联免疫测定等领域有应用。
- 荧光酶标仪:主要用于检测荧光标记物的含量和性质,如荧光标记的DNA、蛋白质、细胞等,广泛应用于生物医学、生物学和环境等领域的研究和应用,如基因表达、细胞信号传导、药物筛选、食品安全检测等。
- 操作特点:
- 普通酶标仪:技术成熟,成本低,操作简单,但检测性能有限。
- 荧光酶标仪:操作结构相对复杂,需要定期进行光源的校正,以确保样品的检测结果准确可靠,但支持多波长检测和自动化操作,具有高通量分析的特点,96孔或384孔板设计,单次可完成数十至数百样本的检测。
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