发酵罐的灭菌方法
发酵罐的灭菌方法是确保发酵过程无菌、防止杂菌污染的关键环节,直接影响产品的质量与产量。常用的灭菌方法主要包括湿热灭菌、化学灭菌及过滤除菌等,其中湿热灭菌应用最为广泛。湿热灭菌是利用高温高压蒸汽杀灭微生物,通常采用在位灭菌(SIP)方式。操作时,将发酵罐密闭,通入饱和蒸汽,使罐内温度达到121℃,维持压力0.1MPa以上,持续15~30分钟。该方法灭菌彻底,适用于罐体、管道、阀门等整体灭菌,但对设备耐压性要求较高,且需严格控制温度与时间,避免灭菌不彻底或破坏培养基成分。
化学灭菌适用于不耐高温的部件或表面消毒,常用消毒剂如75%乙醇、过氧乙酸、次氯酸钠等。操作时,将消毒剂喷洒或循环流经发酵罐内壁及管道,作用一定时间后用无菌水冲洗干净。该方法操作简便,但灭菌效果受消毒剂浓度、接触时间及表面清洁度影响,常作为辅助灭菌手段。
过滤除菌主要用于空气、培养基等热敏性物质的灭菌。发酵过程中通入的空气需经高效空气过滤器(如HEPA)除菌,防止杂菌随空气进入罐内。对于含热敏成分的培养基,可采用过滤除菌代替湿热灭菌,确保有效成分不被破坏。
此外,灭菌前需对发酵罐进行彻底清洗,去除残留物与生物膜,以提高灭菌效果。灭菌后需进行无菌检测,确保罐内无杂菌残留。总之,发酵罐灭菌需根据工艺要求、设备特性及培养基成分选择合适方法,并结合严格的操作规程,才能保证发酵过程的顺利进行。
很实用的文章,谢谢分享。
页:
[1]