直链淀粉和支链淀粉的测定
一、测定原理直链淀粉与碘作用生成纯蓝色复合物，支链淀粉与碘作用生成紫红色复合物。两种淀粉与碘形成的络合物在可见光波段具有不同的吸收峰，通过双波长比色法（如直链淀粉在λ₁和λ₂波长下测定，支链淀粉在λ₃和λ₄波长下测定），可消除背景干扰，利用吸光度差值与淀粉浓度的线性关系进行定量分析。二、测定步骤[*]标准溶液制备
[*]直链淀粉标准液：称取直链淀粉纯品（如马铃薯直链淀粉）0.1000g，用0.5mol/L KOH溶液溶解后定容至100ml，配制成1mg/ml标准液。
[*]支链淀粉标准液：称取支链淀粉纯品（如玉米支链淀粉）0.1000g，同法配制成1mg/ml标准液。
[*]标准曲线绘制
[*]直链淀粉标准曲线：吸取直链淀粉标准液0、0.3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3ml于50ml容量瓶中，加蒸馏水30ml，用0.1mol/L HCl调pH至3.5，加入0.5ml碘试剂（2g碘化钾+0.2g碘溶于100ml蒸馏水），定容后静置20min。以蒸馏水为空白，在λ₁和λ₂波长下测定吸光度差值（ΔA直=Aλ₁-Aλ₂），绘制ΔA直与直链淀粉含量（mg）的标准曲线。
[*]支链淀粉标准曲线：吸取支链淀粉标准液2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5ml于50ml容量瓶中，同法操作，在λ₃和λ₄波长下测定吸光度差值（ΔA支=Aλ₄-Aλ₃），绘制ΔA支与支链淀粉含量（mg）的标准曲线。
[*]样品测定
[*]试样制备：取风干样品粉碎后过60目筛，用乙醚脱脂，称取脱脂样品0.1g（精确至1mg）于50ml容量瓶中。
[*]提取：加0.5mol/L KOH溶液10ml，沸水浴加热10min，冷却后定容至50ml，静置。
[*]测定：吸取样品液2.5ml两份（一份为测定液，一份为空白液），均加蒸馏水30ml，用0.1mol/L HCl调pH至3.5。测定液中加入0.5ml碘试剂，空白液不加碘试剂，均定容至50ml后静置20min。以空白液为对照，在λ₁、λ₂、λ₃、λ₄波长下测定吸光度，计算ΔA样直=Aλ₂-Aλ₁和ΔA样支=Aλ₄-Aλ₃。
[*]结果计算：根据标准曲线查得样品中直链淀粉和支链淀粉含量（mg），按公式计算其百分比：
\text{直链淀粉含量（%）} = \frac{C_1 \times 50 \times 10 \times (1-W_1-W_2)}{m \times 1000} \times 100
\text{支链淀粉含量（%）} = \frac{C_2 \times 50 \times 10 \times (1-W_1-W_2)}{m \times 1000} \times 100
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